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SCI论文

[1] Zhao H, Wei R, Wang L, Tian Q, Tao M, Ke J, Liu Y, Hou W, Zhang L, Yang J, Hong T(通讯作者). Activation of glucagon-like peptide-1 receptor inhibits growth and promotes apoptosis of human pancreatic cancer cells in a cAMP-dependent manner. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2014, 306: E1431-1441.

[2] Wang L, Liu Y, Yang J, Zhao H, Ke J, Tian Q, Zhang L, Wen J, Wei R, Hong T（共同通讯作者）. Liraglutide upregulates PC1-mediated proinsulin processing in pancreatic β cells via a PKA-dependent pathway. Endocrinology. 2014, doi: 10.1210/en.2014-1218.

[3] Liu Y, Wei R, Hong T(通讯作者). Potential roles and mechanisms of glucagon-like peptide-1 in non-alcoholic fatty liver disease. World J Gastroenterol. 2014, 20(27): 9090-9097.

[4] Zhao H, Wang L, Wei R, Xiu D, Tao M, Ke J, Liu Y, Yang J, Hong T(通讯作者). Activation of glucagon-like peptide-1 receptor inhibits tumourigenicity and metastasis of human pancreatic cancer cells via PI3K/Akt pathway. Diabetes Obes Metab. 2014. doi: 10.1111/dom.12291

[5] Liu Y, Hong T (通讯作者). Combination therapy of dipeptidyl peptidase-4 inhibitors and metformin in type 2 diabetes: Rationale and evidence. Diabetes Obes Metab2014,16:111-117.

[6] Chen Y, Feng R, Wang H, Wei R, Yang J, Wang L, Wang H, Zhang L, Hong T (共同通讯作者), Wen J. High-fat diet induces early-onset diabetes in heterozygous Pax6 mutant mice. Diabetes Metab Res Rev. 2014. doi: 10.1002/dmrr.2572 .

[7] Gao M, Yang J, Wei R, Liu G, Zhang L, Wang H, Wang G, Gao H, Chen G, Hong T (通讯作者). Ghrelin induces cardiac lineage differentiation of human embryonic stem cells through ERK1/2 pathway. Int J Cardiol. 2013, 167(6):2724-2733.

[8] Wei R, Yang J, Hou W, Liu G, Gao M, Zhang L, Wang H, Mao G, Gao H, Chen G, Hong T (通讯作者). Comparation of insulin-producing cells derived from human embryonic stem cells based on the definitve endoderm and the nestin positive progenitors. Plos One 2013, 8(8):e72513.

[9] Wei R, Yang J, Liu GQ, Gao MJ, Hou WF, Zhang L, Gao HW, Liu Y, Chen GA, Hong TP (通讯作者). Dynamic expression of microRNAs during the differentiation of human embryonic stem cells into insulin-producing cells. Gene 2013, 518(2):246-255.

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[12] Gao M, Yang J, Liu G, Wei R, Zhang L, Wang H, Wang G, Gao H, Chen G, Hong T (通讯作者). Ghrelin promotes the differentiation of human embryonic stem cells in infarcted cardiac microenvironment. Peptides 2012, 34(2):373-379.

[13] He QH, Zhang XY, Lu AL, Lan F, Hong TP (通讯作者), Shen L. Combination of PCR fragment sequencing and genotyping for the diagnosis of Kennedy’s disease. Chin J Biochem Mol Biol 2012, 28(3):283-288.

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[15] Zhu D,Chen L,Hong T. Position Statement of the Chinese Diabetes Society regarding stem cell therapy for diabetes. J Diabetes2012, 4(1):18-21.

[16] Yang J, Liu GQ, Wei R, Hou WF, Gao MJ, Zhu MX, Wang HN, Chen GA, Hong TP (通讯作者). Ghrelin promotes the differentiation of human embryonic stem cells into cardiomyocytes. Acta Pharmacol Sin 2011, 32(10):1239-1245.

[17] Liu J, Lu G, Li F, Wang H, He L, Hao Y, Chen AF, An H, Wang X, Hong T (共同通讯作者), Wang G. PPAR α agonist fenofibrate upregulates tetrahydrobiopterin level through increasing the expression of guanosine triphosphate cyclohydrolase-i in human umbilical vein endothelial cells. PPAR Res 2011, 2011:523520.

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[19] Liu Z, Wang H, Xiao W, Wang C, Liu G, Hong T (通讯作者). Thyrocyte interleukin-18 expression is up-regulated by interferon-g and may contribute to thyroid destruction in Hashimoto's thyroiditis. Int J Exp Pathol 2010, 91(5):420-425

[20] He L, Zeng H, Li F, Feng J, Liu S, Liu J, Yu J, Mao J, Hong T, Chen AF, Wang X, Wang G. Homocysteine impairs coronary artery endothelial function by inhibiting tetrahydrobiopterin in patients with hyperhomocysteinemia. Am J Physiol Endocrinol Metab 2010, 299(6):E1061-1065.

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[28] Hong TP, Andersen NA, Nielsen K, Karlsen AE, Fantuzzi G, Eizirik DL, Dinarello CA, Mandrup-Poulsen T. Interleukin-18 mRNA, but not interleukin-18 receptor mRNA, is constitutively expressed in islet beta-cells and up-regulated by IFN-gamma. Eur Cytokine Netw 2000, 11(2):193-205.

发表文章200余篇

近5年来的主要论文：

[1] 洪天配. 关注糖尿病治疗新方法的转化医学研究进展. 中国医学前沿杂志(电子版) , 2014, 6(1): 1-3.

[2] 洪天配. 转化医学在地特胰岛素治疗2型糖尿病中的体现. 中国糖尿病杂志. 2014, 22(3):283-285.

[3] 侯文芳, 洪天配 (通讯作者). 减肥手术治疗和预防 2 型糖尿病的研究进展. 中国医学前沿杂志(电子版) , 2014, 6(1): 14-18.

[4] 王琛, 高洪伟, 洪天配 (通讯作者). 人工胰腺的研究新进展. 中国医学前沿杂志(电子版) , 2014, 6(1): 4-8.

[5] 肖文华, 洪天配 (通讯作者). 基于胰高糖素样肽1药物的心血管安全性. 中国医学前沿杂志(电子版) , 2014, 6(1):19-23.

[6] 谢超, 洪天配 (通讯作者). 基于胰高糖素样肽1药物的胰腺安全性. 中国医学前沿杂志(电子版) , 2014, 6(1):24-28.

[7] 柯静, 魏蕊, 洪天配 (通讯作者), 刘烨, 杨进, 田勍, 张琳, 王广. 二甲双胍联合利拉鲁肽对棕榈酸诱导的内皮细胞氧化损伤具有协同保护作用. 中华糖尿病杂志. 2014, 6(5):312-316.

[8] 李菊芬, 柯静, 杨进, 魏蕊, 洪天配 (通讯作者). 利拉鲁肽改善波动性高糖诱导的内皮细胞氧化损伤的研究. 中国糖尿病杂志. 2014, 22(5):455-458.

[9] 魏蕊, 洪天配 (通讯作者). 干细胞技术在内分泌代谢病中的研究进展. 中华内分泌代谢杂志. 2014, 30(3):250-253.

[10] 杨进, 魏蕊, 洪天配 (通讯作者). 2型糖尿病发病机制的新视角：胰岛β细胞去分化. 中华糖尿病杂志. 已接受.

[11] 魏蕊, 杨进, 洪天配 (通讯作者), 高美娟, 侯文芳, 刘国强, 张琳, 王海宁, 高洪伟. Ghrelin以非经典受体依赖性方式促进人胚胎干细胞定向分化为心肌细胞. 中国糖尿病杂志. 已接收.

[12] 刘国强, 魏蕊, 洪天配 (通讯作者). 干细胞移植治疗糖尿病的研究进展. 中国医学前沿杂志. 2014, 6(1): 9-13.

[13] 高洪伟, 洪天配 (通讯作者). 基于胰高血糖素样肽 -1 药物在 2 型糖尿病治疗中的地位. 临床药物治疗杂志. 2014, 12(1): 4-17.

[14] 马世凤, 洪天配 (通讯作者), 魏蕊, 刘烨, 杨进, 张琳, 王广. 艾塞那肽对同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用及其潜在机制. 中国糖尿病杂志 2013, 21(4):137-141.

[15] 安慧杰, 洪天配 (通讯作者), 王广, 魏蕊, 刘烨, 杨进, 张琳. 二甲双胍对波动性高糖诱导的内皮细胞功能障碍的逆转作用及其机制. 中华糖尿病杂志 2013, 5(4):231-234.

[16] 魏蕊, 洪天配 (通讯作者). 血管内皮细胞对胰岛发育和功能的影响. 世界华人消化杂志2013, 21(25): 2493-2499.

[17] 洪天配, 魏蕊. 关注肥胖与糖尿病相关性及其潜在机制的研究进展.中华医学杂志 2013, 93(36):2849-2850.

[18] 安慧杰, 魏蕊, 洪天配 (通讯作者). 二甲双胍对2型糖尿病患者的心血管保护作用:证据及其潜在机制.中华内分泌代谢杂志 2013, 29(9):

[19] 刘慧琳, 田勍, 洪天配 (通讯作者), 刘桂花, 潘欢, 王海宁, 高洪伟. 脓毒症患者中血清程序化细胞死亡因子5水平的変化. 北京大学学报（医学版）2013,45(2): 238-241.

[20] 侯文芳, 田勍, 肖文华, 洪天配 (通讯作者). 表现为中枢性尿崩症和颈椎病变的朗格汉斯细胞组织细胞增生症的临诊应对.中华内分泌代谢杂志2013, 29(6): 531-533

[21] 侯文芳, 肖文华, 洪天配 (通讯作者). 噻唑烷二酮类药物对2型糖尿病患者骨代谢的影响及其机制. 中国糖尿病杂志 2013, 22(7):666-668.

[22] 刘烨, 方纬, 洪天配, 朱朝晖, 王海宁. 核素分子影像技术在胰岛β细胞显像中的研究进展. 中华核医学与分子影像杂志 2013, 33(1):74-78.

[23] 刘烨, 洪天配 (通讯作者). 二肽基肽酶-4抑制剂与二甲双胍联合治疗的有效性与安全性. 中华糖尿病杂志 2013, 5(7):437-440

[24] 洪天配. DPP-4抑制剂治疗2型糖尿病患者所具有的综合益处. 药品评价 2013, 10(11):40-43

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[27] 田勍, 高洪伟, 洪天配. 从临床视角谈糖化血红蛋白检测的重要性及其结果判读. 中华检验医学杂志 2012, 35(6):505-508.

[28] 马世凤, 王琛, 洪天配 (通讯作者). 胰高血糖素样肽-1及其类似物对血管内皮功能的有益效应. 中华糖尿病杂志 2012, 4(9):564-568.

[29] 刘烨, 洪天配 (通讯作者). DPP-4抑制剂与二甲双胍联合治疗的合理性及其研究证据. 中华内分泌代谢杂志 2012, 28(12):1033-1035.

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[31] 洪天配. 内分泌代谢病的转化医学研究. 中华内分泌代谢杂志 2012, 28(3):171-174.

[32] 洪天配. 新型口服降糖药DPP-4抑制剂: 从胰岛α细胞看2型糖尿病治疗的新进展. 中国糖尿病杂志 2012, 20(7):558-560.

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[37] 王琛, 王广, 何立芸, 郝燕婷, 洪天配 (通讯作者). 糖代谢异常对患者冠状动脉内皮功能影响的研究. 山东医药 2011, 51(36):7-8.

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[40] 洪天配, 田勍. 基础胰岛素的药理学和药代动力学特点. 药品评价 2011, 08(15):18-21.

[41] 洪天配. 德谷门冬双胰岛素制剂——积极应对胰岛素治疗障碍. 药品评价 2011, 08(21):60-63.

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[43] 魏蕊
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[44] 谢超，侯文芳 ，洪天配 (通讯作者)
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[46] 高妍 ，郭晓蕙
，段文若，罗涌 ，胡茂清
，孙丽荣，王立 ，卜瑞芳
，洪天配，徐焱成 ，张木勋
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[61] 谢超，王海宁
，林玉晶，高洪伟 ，洪天配 (通讯作者). 那格列奈与阿卡波糖对2型糖尿病患者餐后血清游离脂肪酸水平的影响. 中国糖尿病杂志 2009, 17(5):323-326.

[62] 王海宁
，陈丽，洪天配 (通讯作者). Medisafe快速血糖仪性能的评价. 中国糖尿病杂志 2009, 17(3):231-234.

[63] 王海宁 ，方纬
，刘辰，苏保满 ，高洪伟
，洪天配，何作祥. 2型糖尿病患者氟-18标记脱氧葡萄糖心肌代谢显像图像质量与相关代谢因素的分析. 中华老年医学杂志 2009, 28(1):11-14.

[64] 杨进 ，刘国强
，洪天配 (通讯作者). 治疗性克隆与体细胞重编程：殊途同归. 生理科学进展 2009, 40(2):101-105.

[65] 陈园园，洪天配 (通讯作者). 转录因子Pax6在胰岛发育和葡萄糖代谢调节中的作用. 国际内分泌代谢杂志 2009, 29(3):157-160.

[66] 高洪伟 ，洪天配 (通讯作者). 血糖控制目标是否越接近正常越好. 中国实用内科杂志 2009, 29(3):205-208.

[67] 洪天配. 关注胰岛素原/总胰岛素比值在胰岛β细胞功能评价中的意义. 中国糖尿病杂志 2009, 17(5):321-322. (述评)

[68] 张琳，洪天配 (通讯作者). 内向整流钾通道Kir6.2与胰岛素分泌功能. 中国糖尿病杂志 2009, 17(5):344-347.

[69] 魏蕊
，刘国强，洪天配. 胰岛细胞再生研究的临床应用前景. 医学与哲学 2009, 30(12):13-16. (临床决策论坛)

[70] 洪天配. 2型糖尿病患者胰岛β细胞凋亡及其干预对策. 中华糖尿病杂志 2009, 1(4):310-313.

[71] 洪天配 ，包玉倩. 中华医学会糖尿病学分会青年委员会首届青年医师论坛会议纪要. 中华糖尿病杂志 2009, 1(6):470-471.

[72] 田勍
，杜颖，洪天配 (通讯作者). 2009年糖尿病领域研究进展和热点问题回顾. 中国医学前沿杂志 2009, 1(2):13-17.

关于克隆的资料

主回答

克隆属于无性繁殖技术。

补充回答

一
、简介

克隆是英文"clone"或"cloning"的音译 ，而英文"clone"则起源于希腊文"Klone"
，原意是指以幼苗或嫩枝插条，以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物 ，如扦插和嫁接 。在大陆译为“无性繁殖”
，在台湾与港澳一般意译为复制，转殖或群殖
。 中文也有更加确切的词表达克隆 ，“无性繁殖 ”、“无性系化
”以及“纯系化”。

克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖
，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群 。通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因的个体或种群
。

二 、中国克隆技术

规范干细胞和克隆技术研究。　克隆人离我们只有一步之遥，如何让克隆技术不是给人们出难题 ，而是在人类可以控制的范围内最大限度地造福人类？北京大学干细胞研究中心首席科学家李凌松教授说：

“目前公认的国际规范有三点，一是坚决反对克隆人
，二是不能将人的精原细胞与动物杂交，三是对用于实验的胚胎干细胞来源要进行限制并作出具体规定 。在中国相关规定和法律没有出台之前 ，我们的研究将按照国际规范行事
。 ”

“对于一些国际规范模糊不清的‘灰色区域’
，不同国家做法也不一样，比如信奉基督教的英国人规定 ，体外授精14天后的受精卵不得用于实验
，而以色列则没有这样的规定，对于这些‘灰色区域’ ，我们要根据自己的国情具体分析。
”

据了解
，目前，虽然国际上普遍对克隆人即生殖性克隆持反对态度 ，但对治疗性克隆
，也就是利用克隆技术获得人类干细胞以用于对病变组织和器官进行替代治疗，则基本认同 。但专家认为 ，目前能用于临床的治疗性克隆技术尚处于细胞替代性治疗阶段，真正克隆出可用于移植的人类组织和器官
，现在还为时尚早
。

“干细胞和克隆研究需要相当的技术
、先进的设备和良好的道德基础，”李教授强调说 ，“涉及这个领域的研究机构必须具备相当的实力和资质
，否则很容易造成失控。 ”

据悉，目前 ，一个由国家有关部门召集、有生物学家和伦理学家参与的专家小组正在对中国干细胞及克隆技术研究现状进行评议
，一个旨在规范中国干细胞和克隆技术研究的“审查委员会
”正在酝酿之中 。

三 、理性发展

新华网华盛顿12月11日电（新华社记者吴伟农）每当出现重大克隆进展时，各种警告和反对声便不绝于耳。最近美国先进细胞技术公司宣布通过克隆制造出了人类胚胎之后 ，批评言论又是不断
。对于克隆技术研究
，人们应该一分为二地看待这个问题，以促进克隆技术的安全使用和健康发展。

不妨先回顾一下先进细胞技术公司的成果：这家公司研究人员将人类体细胞的遗传物质与去除了遗传物质的人卵细胞空壳融合 ，然后诱导融合后的细胞发育：研究人员得到3个早期胚胎
，其中两个发育到4细胞阶段，另一个至少发育到6细胞阶段 。由于这证明人体单个细胞的遗传物质能被诱导发育成为幼胚胎 ，克隆人在技术上离现实可谓一步之遥
。

争论由此而生。批评者说，因为它用一个单亲制造了人类的开端
，这一进展在伦理道德上是危险的 。反对者说，即使不为克隆人 ，为获取干细胞而破坏克隆胚胎的做法也是不道德的
。但先进细胞技术公司的科学家称
，他们的目标不是制造克隆人，而是为了开发人类疾病的治疗方法 ，其工作是“正义的”。

关于克隆的资料

克隆是英文clone的音译
，简单讲就是一种人工诱导的无性繁殖方式 。但克隆与无性繁殖是不同的
。无性繁殖是指不经过雌雄两性生殖细胞的结合
、只由一个生物体产生后代的生殖方式，常见的有孢子生殖、出芽生殖和分裂生殖。由植物的根 、茎
、叶等经过压条或嫁接等方式产生新个体也叫无性繁殖 。绵羊、猴子和牛等动物没有人工操作是不能进行无性繁殖的
。科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫克隆 ，这门生物技术叫克隆技术。

克隆的基本过程是先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中
，利用微电流刺激等使两者融合为一体，然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎 ，当胚胎发育到一定程度后
，再被植入动物子宫中使动物怀孕，便可产下与提供细胞者基因相同的动物 。这一过程中如果对供体细胞进行基因改造 ，那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相同的变化。

克隆技术不需要雌雄交配，不需要精子和卵子的结合
，只需从动物身上提取一个单细胞，用人工的方法将其培养成胚胎 ，再将胚胎植入雌性动物体内
，就可孕育出新的个体
。这种以单细胞培养出来的克隆动物，具有与单细胞供体完全相同的特征 ，是单细胞供体的“复制品 ”。英国英格兰科学家和美国俄勒冈科学家先后培养出了“克隆羊
”和“克隆猴” 。克隆技术的成功
，被人们称为“历史性的事件，科学的创举 ”
。有人甚至认为 ，克隆技术可以同当年原子弹的问世相提并论。

克隆技术可以用来生产“克隆人”
，可以用来“复制
”人，因而引起了全世界的广泛关注 。对人类来说 ，克隆技术是悲是喜
，是祸是福？唯物辩证法认为，世界上的任何事物都是矛盾的统一体 ，都是一分为二的
。克隆技术也是这样。如果克隆技术被用于“复制”像希特勒之类的战争狂人，那会给人类社会带来什么呢？即使是用于“复制 ”普通的人
，也会带来一系列的伦理道德问题 。如果把克隆技术应用于畜牧业生产，将会使优良牲畜品种的培育与繁殖发生根本性的变革
。若将克隆技术用于基因治疗的研究 ，就极有可能攻克那些危及人类生命健康的癌症 、艾滋病等顽疾。克隆技术犹如原子能技术
，是一把双刃剑，剑柄掌握在人类手中 。人类应该采取联合行动 ，避免“克隆人
”的出现
，使克隆技术造福于人类社会
。

克隆技术研究现状

一
、克隆的早期研究

克隆一词是英文单词clone的音译，作为名词 ，c1one通常被意译为无性繁殖系。同一克隆内所有成员的遗传构成是完全相同的
，例外仅见于有突变发生时 。自然界早已存在天然植物、动物和微生物的克隆，例如：同卵双胞胎实际上就是一种克隆。然而 ，天然的哺乳动物克隆的发生率极低
，成员数目太少（一般为两个），且缺乏目的性 ，所以很少能够被用来为人类造福，因此
，人们开始探索用人工的方法来生产高等动物克隆
。这样，克隆一词就开始被用作动词 ，指人工培育克隆动物这一动作。

目前
，生产哺乳动物克隆的方法主要有胚胎分割和细胞核移植两种 。克隆羊“多莉”，以及其后各国科学家培育的各种克隆动物 ，采用的都是细胞核移植技术
。所谓细胞核移植
，是指将不同发育时期的胚胎或成体动物的细胞核，经显微手术和细胞融合方法移植到去核卵母细胞中 ，重新组成胚胎并使之发育成熟的过程。与胚胎分割技术不同
，细胞核移植技术，特别是细胞核连续移植技术可以产生无限个遗传相同的个体 。由于细胞核移植是产生克隆动物的有效方法 ，故人们往往把它称为动物克隆技术
。

采用细胞核移植技术克隆动物的设想
，最初由汉斯·施佩曼在1938年提出，他称之为“奇异的实验 ” ，即从发育到后期的胚胎（成熟或未成熟的胚胎均可）中取出细胞核，将其移植到一个卵子中。这一设想是现在克隆动物的基本途径 。

从1952年起
，科学家们首先采用青蛙开展细胞核移植克隆实验，先后获得了蝌蚪和成体蛙
。1963年 ，我国童第周教授领导的科研组
，首先以金鱼等为材料，研究了鱼类胚胎细胞核移植技术 ，获得成功。

哺乳动物胚胎细胞核移植研究的最初成果在1981年取得——卡尔·伊尔门泽和彼得·霍佩用鼠胚胎细胞培育出发育正常的小鼠 。1984年
，施特恩·维拉德森用取自羊的未成熟胚胎细胞克隆出一只活产羊，其他人后来利用牛 、猪、山羊
、兔和猕猴等各种动物对他采用的实验方法进行了重复实验
。1989年 ，维拉德森获得连续移核二代的克隆牛。1994年
，尼尔·菲尔斯特用发育到至少有120个细胞的晚期胚胎克隆牛 。到1995年，在主要的哺乳动物中 ，胚胎细胞核移植都获得成功
，包括冷冻和体外生产的胚胎；对胚胎干细胞或成体干细胞的核移植实验，也都做了尝试。但到1995年为止 ，成体动物已分化细胞核移植一直未能取得成功
。

二、克隆羊“多莉
”的意义和引起的反响

以上事实说明，在1997年2月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前
，胚胎细胞核移植技术已经有了很大的发展。实际上，“多莉 ”的克隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程 ，但这并不能减低“多莉
”的重大意义
，因为它是世界上第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研究的巨大突破 。这一巨大进展意味着：在理论上证明了 ，同植物细胞一样
，分化了的动物细胞核也具有全能性，在分化过程中细胞核中的遗传物质没有不可逆变化；在实践上证明了 ，利用体细胞进行动物克隆的技术是可行的
，将有无数相同的细胞可用来作为供体进行核移植，并且在与卵细胞相融合前可对这些供体细胞进行一系列复杂的遗传操作 ，从而为大规模复制动物优良品种和生产转基因动物提供了有效方法
。

在理论上
，利用同样方法，人可以复制“克隆人” ，这意味着以往科幻小说中的独裁狂人克隆自己的想法是完全可以实现的。因此，“多莉 ”的诞生在世界各国科学界 、政界乃至宗教界都引起了强烈反响
，并引发了一场由克隆人所衍生的道德问题的讨论 。各国政府有关人士
、民间纷纷作出反应：克隆人类有悖于伦理道德
。尽管如此，克隆技术的巨大理论意义和实用价值促使科学家们加快了研究的步伐 ，从而使动物克隆技术的研究与开发进入一个高潮。

三、近3年来克隆研究的重要成果

克隆羊“多莉
”的诞生在全世界掀起了克隆研究热潮
，随后，有关克隆动物的报道接连不断 。1997年3月 ，即“多莉”诞生后1个月
，美国 、中国台湾和澳大利亚科学家分别发表了他们成功克隆猴子
、猪和牛的消息
。不过，他们都是采用胚胎细胞进行克隆 ，其意义不能与“多莉 ”相比。同年7月
，罗斯林研究所和PPL公司宣布用基因改造过的胎儿成纤维细胞克隆出世界上第一头带有人类基因的转基因绵羊“波莉”（Polly） 。这一成果显示了克隆技术在培育转基因动物方面的巨大应用价值
。

1998年7月，美国夏威夷大学Wakayama等报道 ，由小鼠卵丘细胞克隆了27只成活小鼠
，其中7只是由克隆小鼠再次克隆的后代，这是继“多莉
”以后的第二批哺乳动物体细胞核移植后代。此外 ，Wakayama等人采用了与“多莉”不同的、新的 、相对简单的且成功率较高的克隆技术，这一技术以该大学所在地而命名为“檀香山技术 ” 。

此后
，美国
、法国、荷兰和韩国等国科学家也相继报道了体细胞克隆牛成功的消息；日本科学家的研究热情尤为惊人，1998年7月至1999年4月 ，东京农业大学 、近畿大学
、家畜改良事业团、地方（石川县 、大分县和鹿儿岛县等）家畜试验场以及民间企业（如日本最大的奶商品公司雪印乳业等）纷纷报道了
，他们采用牛耳部、臀部肌肉
、卵丘细胞以及初乳中提取的乳腺细胞克隆牛的成果。至1999年底，全世界已有6种类型细胞——胎儿成纤维细胞、乳腺细胞 、卵丘细胞
、输卵管／子宫上皮细胞、肌肉细胞和耳部皮肤细胞的体细胞克隆后代成功诞生
。

2000年6月 ，中国西北农林科技大学利用成年山羊体细胞克隆出两只“克隆羊
”
，但其中一只因呼吸系统发育不良而早夭。据介绍，所采用的克隆技术为该研究组自己研究所得 ，与克隆“多莉”的技术完全不同
，这表明我国科学家也掌握了体细胞克隆的尖端技术 。

在不同种间进行细胞核移植实验也取得了一些可喜成果，1998年1月 ，美国威斯康星一麦迪逊大学的科学家们以牛的卵子为受体
，成功克隆出猪 、牛
、羊、鼠和猕猴五种哺乳动物的胚胎，这一研究结果表明 ，某个物种的未受精卵可以同取自多种动物的成熟细胞核相结合
。虽然这些胚胎都流产了，但它对异种克隆的可能性作了有益的尝试。1999年
，美国科学家用牛卵子克隆出珍稀动物盘羊的胚胎；我国科学家也用兔卵子克隆了大熊猫的早期胚胎，这些成果说明克隆技术有可能成为保护和拯救濒危动物的一条新途径 。

四 、克隆技术的应用前景

克隆技术已展示出广阔的应用前景 ，概括起来大致有以下四个方面：（1）培育优良畜种和生产实验动物；（2）生产转基因动物；（3）生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法；（4）复制濒危的动物物种
，保存和传播动物物种资源
。以下就生产转基因动物和胚胎干细胞作简要说明。

转基因动物研究是动物生物工程领域中最诱人和最有发展前景的课题之一，转基因动物可作为医用器官移植的供体
、作为生物反应器 ，以及用于家畜遗传改良、创建疾病实验模型等 。但目前转基因动物的实际应用并不多
，除单一基因修饰的转基因小鼠医学模型较早得到应用外，转基因动物乳腺生物反应器生产药物蛋白的研究时间较长 ，已进行了10多年
，但目前在全世界范围内仅有2例药品进入3期临床试验，5～6个药品进入2期临床试验；而其农艺性状发生改良 、可资畜牧生产应用的转基因家畜品系至今没有诞生
。转基因动物制作效率低
、定点整合困难所导致的成本过高和调控失灵 ，以及转基因动物有性繁殖后代遗传性状出现分离、难以保持始祖的优良胜状
，是制约当今转基因动物实用化进程的主要原因。

体细胞克隆的成功为转基因动物生产掀起一场新的革命，动物体细胞克隆技术为迅速放大转基因动物所产生的种质创新效果提供了技术可能 。采用简便的体细胞转染技术实施目标基因的转移 ，可以避免家畜生殖细胞来源困难和低效率
。同时，采用转基因体细胞系
，可以在实验室条件下进行转基因整合预检和性别预选。在核移植前，先把目的外源基因和标记基因（如LagZ基因和新霉素抗生基因）的融合基因导入培养的体细胞中 ，再通过标记基因的表现来筛选转基因阳性细胞及其克隆
，然后把此阳性细胞的核移植到去核卵母细胞中，最后生产出的动物在理论上应是100％的阳性转基因动物 。采用此法 ，Schnieke等（Bio Report
，1997）已成功获得6只转基因绵羊，其中3只带有人凝血因子IX基因和标记基因（新霉素抗性基因） ，3只带有标记基因
，目的外源基因整合率高达50％。Cibelli（Science，1997）同样利用核移植法获得3头转基因牛 ，证实了该法的有效性
。由此可以看出
，当今动物克隆技术最重要的应用方向之一，就是高附加值转基因克隆动物的研究开发。

胚胎干细胞（ES）是具有形成所有成年细胞类型潜力的全能干细胞 。科学家们一直试图诱导各种干细胞定向分化为特定的组织类型 ，来替代那些受损的体内组织，比如把产生胰岛素的细胞植入糖尿病患者体内
。科学家们已经能够使猪ES细胞转变为跳动的心肌细胞
，使人ES细胞生成神经细胞和间充质细胞和使小鼠ES细胞分化为内胚层细胞。这些结果为细胞和组织替代疗法开辟了道路 。目前，科学家已成功分离到人ES细胞（Thomson等1998 ，Science）
，而体细胞克隆技术为生产患者自身的ES细胞提供了可能
。把患者体细胞移植到去核卵母细胞中形成重组胚，把重组胚体外培养到囊胚 ，然后从囊胚内分离出ES细胞
，获得的ES细胞使之定向分化为所需的特定细胞类型(如神经细胞，肌肉细胞和血细胞） ，用于替代疗法。这种核移植法的最终目的是用于干细胞治疗
，而非得到克隆个体，科学家们称之为“治疗克隆 ” 。

克隆技术在基础研究中的应用也是很有意义的 ，它为研究配子和胚胎发生
，细胞和组织分化，基因表达调控 ，核质互作等机理提供了工具
。

五 、克隆技术存在的问题

尽管克隆技术有着广泛的应用前景，但离产业化尚有很大距离。因为作为一个新兴的研究领域
，克隆技术在理论和技术上都还很不成熟，在理论上 ，分化的体细胞克隆对遗传物质重编（细胞核内所有或大部分基因关闭
，细胞重新恢复全能性的过程）的机理还不清楚；克隆动物是否会记住供体细胞的年龄，克隆动物的连续后代是否会累积突变基因 ，以及在克隆过程中胞质线粒体所起的遗传作用等问题还没有解决 。

在实践中
，克隆动物的成功率还很低，维尔穆特研究组在培育“多莉“的实验中 ，融合了277枚移植核的卵细胞
，仅获得了“多莉
”这一只成活羔羊，成功率只有0.36％ ，同时进行的胎儿成纤维细胞和胚胎细胞的克隆实验的成功率也分别只有1.7％和1.1％
，即使是使用“檀香山”技术，以分化程度较低的卵丘细胞为核供体 ，其成功率也只有百分之几
。

此外，生出的部分个体表现出生理或免疫缺限。以克隆牛为例
，日本、法国等国培育的许多克隆牛在降生后两个月内死去；到2000年2月，日本全国已共有121头体细胞克隆牛诞生 ，但存活的只有64头 。观察结果表明
，部分犊牛胎盘功能不完善，其血液中含氧量及生长因子的浓度都低于正常水平；有些牛犊的胸腺
、脾和淋巴腺未得到正常发育；克隆动物胎儿普遍存在比一般动物发育快的倾向 ，这些都可能是死亡的原因。

即使是正常发育的“多莉 ”
，也被发现有早衰迹象
。染色体的未端被称为端粒，它决定着细胞能够分裂的次数：每一次分裂端粒都会缩短 ，而当端粒耗尽后细胞就失去了分裂能力。1998年
，科学家发现“多莉
”的细胞端粒比正常的要短，即其细胞处于更衰老的状态 。当时认为 ，这可能是用成年绵羊的细胞克隆“多莉”造成的
，使其细胞具有成年细胞的印记，但这一解释目前受到了挑战 ，美国马萨诸塞州的医生罗伯特·兰扎等用培养的衰老细胞克隆牛，得到6头小牛
，出生5～10个月后发现这些克隆牛的端粒比普通同龄小牛要长，有的甚至比普通新生小牛的端粒还长
。现在还不清楚这一现象的原因 ，也不清楚为何与“多莉“的情况有巨大差别。但这一实验说明
，在一些情况下克隆过程能改变成熟细胞的分子钟，使其“恢复青春 ” ，关于这种变化对克隆动物寿命的影响
，还有待于进一步观察 。

除了以上的理论和技术障碍外，克隆技术（尤其是在人胚胎方面的应用）对伦理道德的冲击和公众对此的强烈反应也限制了克隆技术的应用
。但几年来克隆技术的发展表明 ，世界各科技大国都不甘落后
，谁也没有放弃克隆技术研究。这一点上英国政府的态度非常具有代表性，在1997年2月底宣布中止对“多莉
”研究小组投资后不到1个月 ，英国科技委员会就对克隆技术发表专题报告
，表明英国政府将重新考虑这一决定，认为盲目禁止这方面的研究并不是明智之举 ，关键在于建立一定的规范利用它为人类造福 。

回答者：督☆督 - 试用期 一级 3-7 20:59

一、克隆的概念

众所周知，生物的繁衍是通过生殖完成的
。生物的繁殖有两种方式：一种叫有性生殖
，一种叫无性生殖。

有性生殖是通过两性生殖细胞 ( 精子和卵子 ) 的融合，并发育形成后代的生殖方式 。无性生殖则不经过两性生殖细胞的结合 ，而是由生物体自身的分裂生殖或其体细胞生长发育形成个体
。无性生殖多见于植物与某些动物 ( 如单细胞动物与低等动物 ) 。

克隆是英文“ clone ”的音译
，来自希腊文 klon ， 原意为苗或嫩枝 ，指以无性生殖或营养生殖的一些植物 。随着时间的推移和科学的发展
，它的含义增加了许多内容，如一个细胞在体外培养下产生的一群细胞；由“亲本 ”序列产生的 DNA 序列等等。概言之 ， 克隆是指由一个细胞或个体
，通过无性繁殖手段，获得遗传上相同的细胞群或个体群
。

我国古典名著《西游记》里的孙悟空 ，只要拔撮毫毛吹口仙气
，就能“变”出许多孙悟空。因为拔一撮毫毛必须带下一群细胞，这一群细胞就能培养出一群相同的孙大圣 。这也归属于无性生殖
。只不过孙大圣本领高强 ，能在瞬间“克隆
”出千百个自己而已。简而言之，克隆就是无性生殖
，就是“复制” 、“翻版 ” 。

二
、植物的克隆

无性生殖 ( 克隆 ) 本来是一种低级的生殖方式
。生物进化的层次越低，越有可能采取这种生殖方式 ，进化层次越高
，则越不可能采取这种生殖方式。由于低级生物，如微生物 ，采取自行分裂的方法繁殖
，分裂后子代与亲代的遗传物质完全一样，因此在这个意义上微生物没有“个体
” ，它们也没有死亡 。虽然在严格的意义上
，微生物的亲代与子代仍然会有若干差异，因为它们的外界营养环境仍然会有差异 ，但从高等动物的角度看
，这种差异似乎太微不足道了
。在这种差异可以不计的条件下，人们可以说 ，对微生物来说，它们是不死的。死亡是生物进化到较高阶段的产物 。现在生物医学研究中用克隆技术在体外培养的正常细胞或癌细胞
，也称为“永生细胞株”，意思也是说这些细胞是“不死的 ”
。

生物医学研究进入微观层次 ，运用克隆技术来培养正常或异常细胞的永生细胞株
，虽然是一件难度很大的工作，但已经在各国的科学界和医学界越来越得到重视。在农业上 ，人们早已用插枝、压条等方法
，来繁殖适合于人类需要的植物 。在畜牧业上，各国都在进行用克隆技术产生更多良种动物的研究。但从高等生物成体的体细胞中发育出一个成体 ，这是克隆技术的一个重大发展
。

早在许多年前
，美国康奈尔大学研究人员将成熟的胡萝卜高速搅拌，获得单个胡萝卜细胞 ，然后将这些单个细胞置于生长培养基中
，培养出遗传上完全一样的胡萝卜。这个试验证实了植物细胞全能性学说 。所谓植物细胞全能性学说是指植物体的每一个细胞，包括体细胞 ，都具有发育成完整个体的潜能
。

植物细胞全能性学说在植物界已经得到广泛的证明。现在我们可以植物体的任何一种活的细胞 、组织
、器官，经过体外人工培养获得它的完整植株
，并产生许多植物 。这种技术被称为组织培养
。它已用于工厂化生产花卉、作物 ( 如甘蔗 ) 的试管苗。

三 、动物克隆的历程

关于动物的无性生殖研究，一直是科学家探索的课题 。因为人类通过有性生殖的方法 ，选育家畜品种已有上千年的历史
，结果是产生了一些优良的个体或群体
。它们比一般的个体更能满足人们的需要和愿望。譬如，一头产奶量特别高的奶牛 ，一群毛产量多的绵羊
，一匹得奖的赛马或一只优秀的警犬 。可是，有性生殖的后代 ，其性能不一定都同亲代一样
，有的甚至不如亲代
。究其原因，因为卵子或精子只携带构成亲代的
、任意一半的等位基因 ，而等位基因几乎可以有无限的组合
，因而会产生不同的后代。兄弟、姊妹 、兄妹
、姊弟之间都有很大的差异，便是因为极难有完全相同的基因型 。

所以通过有性生殖保持一种表现型是非常困难的。如果获得一种理想的表现型如产奶量高的奶牛 ，再通过无性生殖保持、扩大和繁殖这种表现型，即生产许多遗传上相同的个体
，从经济角度讲显然是很有价值的
。

⒈卵细胞培养成成体

1951 ～ 1959 年，我国著名细胞生物学家朱冼等 ，用直径 10 ～ 13um 的玻璃针刺激去卵膜的蟾蜍卵细胞
，在世界上首次培养出 25 只蟾蜍成体，即没有父亲的癞蛤蟆。它们最长的可活 8 个月 。

在上述试验中用的是生殖细胞
。体细胞能否通过培养获得动物体呢？即植物细胞具有的全能性 ，动物细胞是否也具有？每个动物细胞
，包括体细胞都具有该物种的全套基因是不容怀疑的，但从体细胞直接培养成动物成体至今尚未成功。为了证明动物细胞也具有全能性 ，生物学家进行了大量的细胞核移植试验 。

⒉细胞核移植试验

1939 年
，科学家首次在变形虫中进行核移植试验
。他们将核移到同种去核变形虫中，结果重组的变形虫可生长 ，并繁殖后代。

1963 年起
，我国著名生物学家童第周等进行了大量的鱼类核移植试验 。其中 1980 年，他们将鲤鱼囊胚期细胞核作供体核 ，鲫鱼的未受精去核成熟卵细胞作受体质， 2.7% 的移核卵发育到成鱼
。鲤鲫移核鱼的主要性状与鲤鱼相同
，但脊椎骨的数目与鲫鱼相同，而侧鳞的数目介于这两种鱼之间。这种细胞工程鱼生长速度比鲤鱼快 22% ，现已在生产上大面积推广 。

1966 年
，科学家用两栖类非洲爪蟾进行核移植试验
。他们将蝌蚪的肠细胞的细胞核移入去核的卵细胞中，结果有 1.5% 的重组细胞发育成体。他们的试验第一次证明了动物的体细胞也具有全能性 ，但在哺乳动物体细胞中尚未证明 。

⒊用胚胎细胞克隆哺乳动物

1986 年
，英国科学家用绵羊的 8 细胞胚胎细胞 ( 在 8 细胞胚胎之前的细胞才能表现全能性 ) 做供核细胞，羊的卵细胞做供质细胞 ，结果重组细胞能发育成羊成体
，此后又相继用胚胎细胞克隆出牛 、鼠、兔
、猴等动物。应该指出的是，该试验并非复制雄性或雌性绵羊 ，而是复制它们的后代
，因此试验还存在一定的不足或缺陷
。

在我国，用胚胎细胞克隆哺乳动物 ， 80 年代末已克隆出免； 1991 年西北农业大学和江苏农学院克隆出羊； 1993 年中国科学院发育研究所与扬州大学农学院克隆出山羊； 1995 年华南师大和广西农业大学克隆出牛。此外，湖南医学院还克隆出鼠 。但是
，用胚胎细胞以外的体细胞克隆出哺乳动物，则是由英国科学家维尔穆特开创的
。

四、“多莉
”的诞生

“多莉”是世界上第一例用体细胞——乳腺上皮细胞 ，通过细胞核移植技术
，在复杂的人工操作下，得到的一只小绵羊。其操作过程是这样的：

⒈从苏格兰黑脸母羊 ( 甲羊 ) 取出卵子 ，并把卵子的遗传物质吸去
，成为只有细胞质的卵子 。

⒉从妊娠后期 3 个月的母羊 ( 乙羊 ) 取出乳腺上皮细胞， 在体外传代培养 3 — 6 代 ，并用药物处理控制细胞发育使之处于休止期
。这是非常关键的一步。然后取休止期的细胞作为供体细胞 。

⒊将一个供体细胞导入上述卵子的透明带内腔
。然后用电脉冲刺激
，使供体细胞和卵子融合，形成重构卵。

⒋把重构卵移植到黑脸母羊 ( 羊丙 ) 的输卵管里 ，此前将丙羊的输卵管结扎
，使胚胎不能进入子宫 。丙羊起到活体培养胚胎的作用，称为中间受体
。

⒌重构卵移入丙羊输卵管内 6 天后 ，从输卵管冲出胚胎， 挑选正常发育到桑椹期和囊胚期的胚胎。

⒍将 1 — 3 个桑椹胚或囊胚
，移植到苏格兰黑脸羊 ( 丁羊 ) 的子宫内 。胚胎移植到子宫后 , 继续发育 , 最后生出“多莉 ”。这只母羊称为“代母
”
。

此项用了约 434 个卵子 , 获得 277 个重构卵 , 移植到中间受体 6 天后，冲出 247 个胚胎 , 其中发育到桑椹胚和囊胚的 29 个 (11.7%) 。把 29 个胚胎移植给 13 只代母 ，最后生出 1 只“多莉” , 产羔率仅为 3.4% 。若以重构卵数计算 , 产羔率低于 4 ‰
。可见这一技术有待于完善。另外需要说明的是
，克隆绵羊技术并没有做到完全复制，去核卵细胞的细胞质也会含有少量遗传物质 ，它对胚胎发育也能起重要甚至是决定性的作用 。生物的遗传是细胞核和细胞质共同作用的结果
。细胞质基因也是 DNA 片段 , 其载体主要是一些细胞器
，如质体 、线粒体等。 细胞质基因在一定程度上是独立的，一般不受核基因的干扰 。与核基因相比尽管细胞核含有 99.9% 的遗传信息 ，但个体的性状表达仍然会受到卵细胞质的影响
。因此
，从理论上分析，“多莉 ”羊还不是完全复制品。由于“多莉
”只是孤单的一个 ，所以有人认为
，说“多莉”是一克隆动物，并不准确 。虽然目前只获得 1 只“多莉 ” ， 但它是令世人瞩目的重大科学成就
。

五
、克隆技术的意义及经济价值

波澜壮阔的人类历史在很大程度上是由技术推动发展的：金属制造和改良的农业使文明脱离了石器时代； 19 世纪的工业革命又导致了大机器和大城市的兴起；到了 20 世纪，物理学戴上了王冠。物理学家们劈开原子
，揭示了相对论和量子理论的奇妙世界，还开发利用了小小的硅片 。他们通过原子弹、晶体管 、激光和微型集成电路改变了世界。现在 ，许多专家相信
，人类已经做好了用新的科技发展浪潮迎接未来的准备
。正如 1996 年诺贝尔奖获得者
、美国赖斯大学的化学家罗伯特·柯尔所说：“现在是物理学和化学的世纪，但下世纪显然将是生物学的世纪。”许多科学家认为 ，以克隆绵羊“多莉
”诞生为标志
，生物学世纪已经提前到来 。

克隆技术的突破，引起世人的震惊
。人们担心的是人类的自我复制 ，而往往忽视了其他方面的应用和意义。其实
，它在基础生命科学、医学 、家业科学研究与生产中，具有重大的理论价值和广泛的应用前景 ，并存在着巨大的潜在经济效益 。在未来的 5 ～ 20 年
， 将逐步形成和引起一场世界范围内新的生物技术产业革命
。

⒈在基础生命科学方面，由以往进行基因功能研究主要在小鼠等少数动物身上进行到现在在多种动物身上均可得到实现 ，这有利于更加清晰地揭示基因功能和生命的本质；提供研究哺乳动物细胞发育全能性及核质关系最有效的手段之一；还可以克隆各种濒危动物，如国宝大熊猫
、金丝猴甚至白鳍豚等。

⒉在医学科学方面
，可以为医学科学研究提供核基因型完全一致的实验动物，这有利于医学家研究目前尚未找到有效治疗方 法的疾病 ，并揭示发病机制；对其进行去分化机制的研究
，有助于抗衰老及其机制的研究 。

⒊在农业科学方面，可快速培育和扩繁抗病力强、生产性能高的优良动物；可以研究动物的发病机理 ，寻求新的有效治疗药物
。

六 、如何迎接“克隆时代”的挑战

克隆技术的成功
，标志着“复制 ”哺乳动物的最后技术障碍已被突破。随之而来，在理论上复制人类已成为可能 。所以 ，克隆技术不仅给我们带来了益处
，也向人类提出了严峻的挑战
。这一技术一旦应用于人类，将会对人类社会产生极其严重的后果。

⒈人类从有性生殖回到了无性生殖 ，

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